PLGA và LrrG protein là gì?
LrrG protein là một protein bảo vệ bề mặt được tìm thấy ở hầu hết các chủng streptococcus agalactiae. Chúng rất giàu leucine và có cấu trúc linh hoạt và đa dạng. Chính vì thế chúng được xem là chất đầy tiềm năng trong việc sản xuất vaccine kháng nguyên .
PLGA là một poly-(lactic-co-glycolic acid) có cấu trúc cao phân tử bền vững và không gây độc hay gây kích thích, có khả năng phân hủy sinh học và đào thải nhanh .Chính vì những đặc điểm này mà chúng được xem là chất mang vaccin hoàn hảo giúp phát huy tối đa tác dụng của chúng khi vào cơ thể cá.
Bố trí thí nghiệm
Tổng cộng 1950 cá rô phi dòng GIFT có trọng lượng 6.0 ± 1.2g được bố trí ngẫu nhiên vào 30 nhóm (65 con/nhóm), cá được cho ăn ngày 2 lần với lượng thức ăn bằng 3% trọng lượng thân.
Thí nghiệm sử dụng cả hai phương pháp cho ăn và tiêm trực tiếp LrrG-PLGA vào cá (100µl/cá thể) với nồng độ như sau:
Thí nghiệm |
Nồng độ LrrG-PLGA(µg/g) |
P1 |
0.5 |
P2 |
1 |
P3 |
2 |
Thí nghiệm cho ăn
Thí nghiệm |
Chất bổ sung |
CK1 |
PBS |
CK2 |
PLGA |
Cảm nhiễm với S.agalactiae
Thí nghiệm được thực hiện theo phương pháp của Bliss,1938. Nồng độ LD50 và tỉ lệ sống tương đối (RPS) sẽ được ghi nhận sau 14 ngày.
Chỉ tiêu và phương pháp phân tích
Chỉ tiêu |
Phương pháp |
Đánh giá LrrG-PLGA |
Gao et al.,2015 |
Mức độ kháng thể serum |
Elisa |
Hoạt động lyzozyme |
Lyzozyme activity assay kit |
Kết Quả
Đánh giá LrrG-PLGA: LrrG-PLGA có hình cầu, trơn láng, có kích cỡ 2.1-7.3µm. Độ hiệu quả của vỏ bọc là 38.54%, năng lực chất mang là 1.98%. Mức độ đào thải 78.97%.
Cảm nhiễm S.agalactiae: Tỉ lệ sống tương đối ở nhóm tiêm lớn hơn nhóm cho ăn. Đối với nhóm tiêm, nồng độ 0.5 µg/g và 1µg/g có tỉ lệ sống cao hơn hẳn với 77.89% và 77.81%. Đối với nhóm cho ăn, tỉ lệ sống ở nhóm 1µg/g (77.54%) cao hơn so với nhóm 0.5µg/g (50.97%) và 2µg/g (60.24%).
Miễn dịch: Nồng độ khả thể serum đạt 0.9133 ở nhóm cho ăn bổ sung 1µg/g. Trong khi đó, nồng độ lyzozyme đạt cao nhất ở mức 347.59 U/ml khi bổ sung 2µg/g.
Kết Luận
Khi bổ sung LrrG-PLGA ở mức 1µg/g sẽ giúp kích thích hệ miễn dịch của cá, tạo kháng thể giúp bảo vệ cơ thể cá. Và mức bổ sung này có ý nghĩa thực tế lớn trong việc sản xuất vaccine thương mại chống lại các chủng streptococcosis gây bệnh trên cá.