Nghiên cứu Lactobacillus sp và fructo-oligosaccharides đối với cá Rô phi
Gần đây, những lợi ích của synbiotics trên động vật thủy sản đã được nhiều người biết đến. Nghiên cứu gần đây cho thấy, việc bổ sung synbiotics sẽ giúp vật nuôi tăng cường khả năng kháng bệnh.
Nghiên cứu được thực hiện bởi các nhà khoa học tại Học Viện Khoa Học Nông Nghiệp Trung Quốc nhằm tiến hành đánh giác động của vi khuẩn Lactobacillus sp và fructo-oligosaccharides (FOS) lên tỉ lệ sống, tăng trưởng và khả năng kháng bệnh của cá Rô phi.
Thí nghiệm 1
7 chủng vi khuẩn Lactobacillus sp lần lượt được nuôi cấy trên môi trường MRS ở nhiệt độ 300C trong 48h. Sau đó sẽ tiến hành ly tâm 2000 vòng/5 phút để lấy dịch vi khuẩn. Hỗn hợp vi khuẩn này với mật số 2 x 10^7 CFU/g, sẽ được phơi khô, ép viên, trữ ở 40C. Sau đó, chuẩn bị thức ăn thí nghiệm theo bảng sau.
Thành phần thức ăn
|
Thành phần |
% |
|
Bột cá |
47 |
|
Bột đậu nành |
24 |
|
Bột bắp |
24 |
|
Dầu đậu nành |
2 |
|
Ca(H2PO4)2 |
2.2 |
|
VCphosphate ester |
0.1 |
|
Choline Chloride(50%) |
0.3 |
|
Hỗn hợp vitamin |
0.2 |
|
Hỗn hợp khoáng |
0.2 |
|
Đạm thô |
42.0 |
|
Chất béo thô |
7.3 |
|
Tro |
9.5 |
|
Xơ thô |
3.1 |
|
Chiết xuất không đạm |
27.9 |
Tổng số cá thí nghiệm là 315 con (0.96±0.07g) được chia làm 2 nhóm G1 và G2. Thí nghiệm lặp lại 2 lần, thời gian thí nghiệm trong vòng 6 tuần. Cá sẽ được cho ăn 2 lần/ngày.
|
Nghiệm thức |
0-2 tuần |
3-6 tuần |
|
G1 |
hỗn hợp chủng vi khuẩn |
Thức ăn |
|
G2 |
|
FOS(1 mg/g) |
Các thông số chất lượng nước được duy trì như sau:
|
Chỉ tiêu |
Khoảng cho phép |
|
pH |
6.5-7.1 |
|
DO |
> 6.13 mg/L |
|
Nhiệt độ |
26 ± 0.50C |
|
Nitrate(NO3-) |
< 0.11mg/L |
Thí nghiệm 2
Chủng vi khuẩn L.brevis JCM 1170 và L.plantarum JCM 1149 mỗi chủng có mật số 10^8 CFU/g thức ăn kết hợp với FOS (1mg/g thức ăn), được bổ sung vào hỗn hợp thức ăn có thành phần như thí nghiệm 1.
Thí nghiệm có 6 nghiệm thức, lặp lại 3 lần. Cá có trọng lượng 0.09g được bố trí vào 18 bể( 20 con/bể). Thí nghiệm diễn ra trong 5 tuần, được bố trí như sau
|
Nghiệm thức |
Thành phần bổ sung |
|
1(Đối chứng) |
Thức ăn |
|
2 |
FOS |
|
3 |
JCM 1170 |
|
4 |
JCM 1170 + FOS |
|
5 |
JCM 1149 |
|
6 |
JCM 1149+ FOS |
Gây cảm nhiễm với A.hydrophila
Cá từ thí nghiệm 2 sẽ được gây cảm nhiễm với A.hydrophyla (10^8 CFU/ml) theo phương pháp ngâm. Tỉ lệ chết được ghi nhận mỗi12h , sau 4 tuần.
Phương pháp và chỉ tiêu phân tích
|
Chỉ tiêu |
Phương pháp |
|
Chiết tách DNA |
He et al. (2009) và Fjellheim et al., 2012 |
|
Tác động của FOS lên chủng Lactobacillus sp |
Zhou et al.,2012 |
|
Tác động của synbiotics lên hệ vi sinh đường ruột |
Tiangen PCR Purification kit |
Kết Quả
Tỉ lệ sống và tăng trưởng: Không có sự khác biệt về tỉ lệ sống, tăng trưởng và hệ số chuyển đổi thức ăn ở tất cả các nghiệm thức.
Ảnh hưởng của FOS lên các chủng vi khuẩn Lactobacillus sp: Khả năng bám dính thành ruột cao nhất được ghi nhận ở chủng L.brevies JCM 1170(35%), L.plantarum JCM 1149(24%) và L.casei(15%). Và khả năng này sẽ tăng lên khi bổ sung thêm FOS.
Ảnh hưởng của synbiotics lên hệ vi sinh đường ruột: Kết quả PCR đã phát hiện các chủng vi khuẩn thuộc 4 họ Protebacteria, Firmicutes, Fusobacteria, Antinobacteria trong mẫu ruột của cá. Điều này chứng tỏ, synbiotics có tác động tích cực đên sự phong phú của hệ vi sinh vật chủ.
Cảm nhiễm với A.hydrophyla: Nghiệm thức có bổ sung L.brevis JCM 1149 kết hợp với FOS có tỉ lệ chết giảm so với các nghiệm thức còn lại.
Kết Luận
Bổ sung Lactobacillus sp với mật số 10^8 CFU/g kết hợp với FOS với liều lượng 1mg/g có tác dụng giúp cá Rô phi tăng cường hoạt động hệ vi sinh đường ruột và tăng khả năng kháng bệnh đối với A.hydrophyla . Giải pháp này cũng góp phần hạn chế tồn lưu kháng sinh trên cá.